УДК г. И. Я. КРЕСТЬЯНОВА, Я. Я. УВАРОВ, Г. Я. РУ ДЕНСКАЯ, В. В. ЦИБАНОВ, Л. И. ВАСИЛЬЕВА, В. М. СТЕПАНОВ

Размер: px
Начинать показ со страницы:

Download "УДК г. И. Я. КРЕСТЬЯНОВА, Я. Я. УВАРОВ, Г. Я. РУ ДЕНСКАЯ, В. В. ЦИБАНОВ, Л. И. ВАСИЛЬЕВА, В. М. СТЕПАНОВ"

Транскрипт

1 . Т. 55, вып. 12 БИОХИМИЯ 1990 УДК г. И. Я. КРЕСТЬЯНОВА, Я. Я. УВАРОВ, Г. Я. РУ ДЕНСКАЯ, В. В. ЦИБАНОВ, Л. И. ВАСИЛЬЕВА, В. М. СТЕПАНОВ ВНУТРИКЛЕТОЧНАЯ АМИНОПЕПТИДАЗА ИЗ XANTHOMONAS RUBRILINEANS, ГИДРОЛИЗУЮЩАЯ ЭФИРЫ «-АМИНОКИСЛОТ И ЦЕФАЛЕКСИН Ключевые слова: аминопептидаза, X. rubrilineans, гидролиз эфиров «-аминокислот, цефалексин. Аминопептидаза выделена из бесклеточного экстракта Xanthomonas rubrilineans осаждением белков изопропиловым спиртом с последующей1 очисткой методами аффинной хроматографии на CABS-сефарозе, бацитрацин-сефарозе, гелщфильтрации на сефадексе G-200 и ультрафильтрации. Общий выход по активности составил 32%, степень очистки 2200 раз. Полученный фермент гомогенен по данным электрофореза. Наряду с широким спектром пептидазной активности ампнопептидаза обладает гидролизной активностью по отношению к 3-лактамным антибиотикам, эстеразной к эфирам L- и D-аминокислот, катализирует реакцию ацильного переноса..при синтезе, цефалексина из эфира D-фенилглицина и 7-аминодезацетоксицефалоспорановой кислоты. Максимальная активность аминопептидазы по гидролизу L-Ala-pNA и цефалексина проявляется при ph 6,5, фермент стабилен в диапазоне ph 4,0 8,0. Активность ингибируется о-фенантролином, /г-хлормеркурбензоатом, ацетатом ртути и N-бромсукцинимидом. Молекулярная масса аминопептидазы кда. Фермент является тетрамерным белком с молекулярной массой субъединиц 70сЬ2 кда. Изоэлектричеокая точка аминопептидазы 6,8.. Определен аминокислотный состав фермента: Asp63, Thr83, Ser32, Glu72, Gly5s, V2Cys3_4, Val45, Ile24, Leuse, Tyr23, Phe24, Lys23, Hisie, Arg36, Pro60, Met25, Ala55. Описан ряд амино- и карбоксипептидаз, продуцентами которых являются многие микроорганизмы. Изучены как внеклеточные, так и внутриклеточные ферменты, различающиеся по физико-химическим параметрам, субстратной специфичности и т. д. Их продуцентами являются Escherichia coli, Bacillus stearothermophilus, Alteromonas B-207,, Lactobacillus acidophilus, Streptococcus diacetylactis [1 6]. При скрининге была выявлена культура Xanthomonas rubrilineans из семейства Pseudomonadaceae, образующая уникальный пул внутриклеточных амино- и карбоксипептидаз. Разработан способ получения суммарного препарата пептидаз из биомассы клеток. Препарат эффективно расщепляет пептиды в кислотных и ферментативных гидролизатах казеина и альбумина до смеси свободных аминокислот (7). Кроме того, было установлено, что суммарный препарат помимо гидролиза пептидных связей катализирует реакцию расщепления амидной связи в (J-лактамном антибиотике цефалексине [8]J Принятые сокращения: «-ХМБ n-хлормеркурбензоат, 7-АДЦК 7-аминодезацетоксицефалоспорановая кислота, ПААГ полиакриламидный гель, ЭДТА этилендиаминтетраацетат, CABS-сефароза аминокапронил-ц-аминобензилсукцинилсефароза 4В, pna га-нитроанилид, DNP 2,4-динитрофенил, Z бензилоксикарбонил Российская Академия Наук. Материал из электронного архива журнала Биохимия. Статья оцифрована в Отделе Научной Информации НИИФХБ им. А.Н. Белозерского МГУ. Использование материала автоматически предполагает выполнение условий Пользовательского соглашения. Постоянная ссылка на материал:

2 До настоящего времени ферменты, входящие в состав данного препарата, не были идентифицированы. Цель настоящей работы выделение и изучение одной из амйнопептидаз, образуемых культурой X. rubп'лпрпп я МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ В работе использовали бактериальную культуру X. rubrilineans. Выращивание проводили на комплексной среде [9]. Для выделения внутриклеточных ферментов биомассу X. rubrilineans лизировали 10%-ным (по объему) бутилацетатом. Обломки клеток удаляли центрифугированием при 3000 g. Из полученного бесклеточного экстракта белки осаждали 1,5-кратным объемом изопропанола, белковый осадок отделяли центрифугированием при 8000 g и растворяли в 0,05 М натрий-ацетатном буфере, ph 6,4, концентрат использовали для дальнейшей работы. Для выделения аминопептидазы ферментный концентрат диализовали против 0,01 MES-буфера, ph 6,4, и наносили на колонку (1,5X6,0 см) с CABS-сефарозой, уравновешенную тем же буфером. Колонку промывали исходным буфером, аминопептидазу элюировали 0,05 М NaCl в 0,01 М MES-буфере, ph 6,4. Фракции, содержащие аминопептидазу, концентрировали и обессоливали ультрафильтрацией. Обессоленный элюат наносили на колонку (1,5X5,0 см) с бацитрацин-сефарозой, уравновешенную 0,05 М натрий-ацетатным буфером, ph 6,4. Колонку промывали исходным буфером, аминопептидазу элюировали 0,5 М NaCl в 25%-ном глицерине. После концентрирования и обессоливания ультрафильтрацией элюат наносили на колонку (1,2X100 см) с сефадексом G-200, уравновешенную 0,05 М натрий-ацетатным буфером, ph 6,4, с 1 мм меркаптоэтанолом и 0,1 М NaCl. Фракции, содержащие аминопептидазу, обессоливали ультрафильтрацией и лиофильно высушивали. Активность аминопептидазы по субстратам L-Ala-pNA, D-Ala-pNA, L-Leu-pNA, D-Leu-pNA, L-Phe-pNa, L-Val-pNA, L-Glu-pNA, L-Arg-pNA, L-Lys-pNA, L-Pro-pNA, Gly-L-Pro-pNA определяли, измеряя количество образующегося нитроанилина, после инкубации фермента в растворе соответствующего субстрата при ph 6,4 и 40. Начальная концентрация субстрата [S]0 равна 2,0 мм. Молярную экстинкцию 84ю образующегося нитроанилина принимали равной 8300 М_1-см-1 [10]. Активность аминопептидазы по гидролизу пептидных субстратов L-Leu-Gly, Gly- Gly, Gly-L-Leu, L-Ala-L-Met, Gly-L-Ala, Gly-L-Asp, Gly-L-Phe, Gly-Gly-Gly, Gly-Gly- L-Ala, Gly-Gly-Gly-Gly ([S]0=20 мм, ph 6,4, 40 ) определяли спектрофотометрически, измеряя количество образующихся аминогрупп методом Сватека [11]. Эстеразную активность характеризовали по гидролизу метиловых эфиров D-фенилглицина, L-аланина и L-лейцина ([S]0= 18,6 мм), цефалексинсинтетазную по образованию цефалексина из метилового эфира D-фенилглицина и 7-АДЦК ([S]0 = 18,6 и 9,3 мм соответственно), а также по расщеплению цефалексина ([S]0=6 мм) при 40, ph 6,4. Количественное определение соответствующих продуктов реакций осуществляли с помощью аминокислотного анализатора LC-5000 («Biotronic» ФРГ), используя катионит DC-4A и систему четырех натрий-цитратных буферных растворов. В каждом случае определяли зависимость количества продукта реакции от времени, а затем находили начальную скорость путем аппроксимации начального участка интегральной кинетической кривой уравнением произвольного порядка по методу наименьших квадратов. Расчеты выполняли на ЭВМ PDP 8/М. Активность аминопептидазы по гидролизу цефалексина в процессе очистки определяли спектрофотометрически, путем измерения образовавшейся 7-АДЦК по методу Сватека [11] после инкубации ферментных растворов в растворе цефалексина ([S]0= 4 мм, 40, ph 6,4). Активность карбоксипептидазы определяли по расщеплению хромогенного субстрата DNP-Gly-Gly-Arg ([S]o=0,5 мм, 40, ph 7,0) согласно ранее описанному методу [ 12], исходя из значения езбю= М_1-см1-1 динитрофенильной группы, активность Glu-специфичной протеиназы по расщеплению хромогенного субстрата Z-GlupNA ([S ]o= 0,5 мм, 40, ph 8,0), используя при расчете e4i)0=8900 МН>-см~г [ 13], активность субтилизиноподобной протеиназы по субстрату Z-Ala-Ala-Leu-pNA ([S]0 = 0,5 мм, 40, ph 8,0). За единицу активности во всех случаях принимали количество фермента, которое катализирует превращение 1 мкмоль субстрата за 1 мин. Влияние компонентов реакций гидролиза и синтеза цефалексина на скорость гидролиза аминопептидазой L-Ala-pNA определяли, измеряя активность фермента по данному субстрату ([S]0=2,0 мм), в присутствии цефалексина (14,0 мм), 7-АДЦК (22,3 мм), D-фенилглицина (24,0 мм) и метилового эфира D-фенилглицина (44,6 мм). В качестве ингибиторов использовали фенилметилсульфонилфторид, диизопропилфторфосфат, о-фенантролин, N-этилмалеинимид, ацетат ртути, моноиодацетамид, ЭДТА, п-хмб, дитиотреитол, меркаптоэтанол в концентрации 0,01 М, N-бромсукцинимид 0,001 М, овомукоид, а также специфические ингибиторы трипсина из сои и фа- 2227

3 соли в концентрации 2 мг/мл. Концентрация фермента составляла 5 мкг в 1 мл натрий-ацетатного буфера, ph 6,4. Ингибирование проводили в течение 1 ч при 20. После ингибирования о-фенантролином активность фермента восстанавливали добавлением Са(СН3СОО)2 или СоС12 (концентрация 0,01 М в 0,05 М натрий-ацетатном буфере, ph 6,4), в случае ингибирования n-хмб для восстановления активности использовали меркаптоэтанол или дитиотреитол (концентрация 0,01 М в 0,05 М трис-нс1-буфере, ph 8,0). Во всех случаях активность аминопептидазы определяли по двум субстратам L-Ala-pNA и цефалексину. За 100% принимали активность фермента перед добавлением ингибитора. Молекулярную массу определяли гель-фильтрацией на сефадексе G-200, а также электрофорезом в 5%-ном полиакриламидном геле в присутствии DS-Na. В качестве маркеров использовали ферритин (514 кда), каталазу (232), альдолазу (158), бычий сывороточный альбумин (67), яичный альбумин (45). Зависимость активности аминопептидазы от ph определяли по субстратам L-AlapNA и цефалексину при 40 в 0,05 М натрий-ацетатном буфере, ph 5,0 6,5, и трис- HCl-буфере, ph 7,0^ 9,0. Для определения стабильности аминопептидазы при различных значениях ph к 0,9 мл 0,05 М натрий-ацетатного буфера, ph 2,0 6,0, 0,05 М трис-нс1-буфера, ph 7,0 9,0, 0,05 М универсального буфера, ph 10,0 11,0, прибавляли 0,1мл раствора фермента (5 мкг/мл). Активность определяли сразу после добавления фермента и через 24 ч по субстратам L-Ala-pNA и цефалексину. Температурный оптимум аминопептидазы определяли, измеряя активность фермента (5 мкг/мл) по субстратам L-Ala-pNA и цефалексину при различных температурах в 0,05 М натрий-ацетатном буфере, ph 6,4. При определении температурной устойчивости аминопептидазы раствор фермента (ph 6,4) выдерживали при температурах в течение мин и определяли остаточную активность (субстраты L-Ala-pNA и цефалексин) при 40. Электрофорез проводили в 7,5%-ном ПААГ, ph 4,3. Белки окрашивали 0,08%-ным раствором кумасси голубого R-250 в 3,5%-ной хлорной кислоте. Разбавленные растворы фермента концентрировали и обессоливали в ячейке для ультрафильтрации («Amicon», Голландия), используя мембраны РМ-30. Изоэлектрофокусирование проводили в градиенте плотности сахарозы в интервале ph 3,0 12,0 [14]. Белок определяли по методу Лоури [15] или спектрофотометрически, измеряя оптическую плотность раствора при 280 нм. Определение аминокислотного состава проводили после гидролиза фермента 5,7 н. НС1 в ампулах, запаянных в вакууме, в течение 48 ч при 105 на аминокислотном анализаторе Durrum D-500 (США). Определение метионина и полуцистина проводили после окисления цистина и метионина надмуравьиной кислотой. РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ Внутриклеточные ферменты выделяли из биомассы X rubrilineans, лизируя клетки бутилацетатом. Для получения ферментного концентрата из бесклеточного экстракта белки осаждали изопропанолом с последующим отделением белкового осадка и растворением его в ацетатном буфере. Электрофоретическое исследование ферментного концентрата показало наличие в нем белковых компонентов (рис. 1). Особый интерес представляла белковая фракция с Rt 0,08, проявляющая активность по субстратам, типичным для аминопептидаз L-Ala-pNA и L- Leu-pNA, и, кроме того, избирательно гидролизующая (1-лактамный антибиотик цефалексин. Данный эффект можно объяснить либо свойством одного фермента, либо одинаковой электрофоретической подвижностью двух ферментов. В связи с этим в процессе очистки аминопептидазы и изучения ее биохимических свойств активность фермента характеризовали по двум субстратам L-Ala-pNA и цефалексину. Очистку аминопептидазы проводили аффинной хроматографией на CABS-сефарозе и бацитрацин-сефарозе, а также гель-фильтрацией на сефадексе G

4 Рис. 1. Электрофорез исходного препарата (1) и препарата аминопептидазы (2) Рис. 2. Аффинная хроматография аминопептидазы на CABSсефарозе: 1 оптическая плотность при 280 нм, 2 6 активности (ед/мл) по L-Ala-pNA (2), цефалексину (3), L-GlupNA (4), DNP-Gly-Gly-Arg (5), Z-Ala-Ala-Leu-pNA (6) 1 2 Рис. 1 О, Рис

5 Выделение аминопептидазы A", r u b r ilin e a n s СтадияГочистки Общий белок, Агао Активность по L-Ala-pNA общая, ед. удельная, пд./лгво Степень очистки Выход по актив- ности, % общая, ед. удельная, ед./лгэо стки Активность по гидролизу цефалексина Степень Выход по активности, % Бесклеточный экстракт , , Осаждение изопропиловым спиртом ,3 и , Диализ ,3 и ,0 и 71 Аффинная хроматография на , , CABS-сефарозе Ультрафильтрация , , Аффинная хроматография на ба 2, цитрацин-сефа розе Ультрафильтрация 2, Гель-фильтрация 0, на сефадексе G- 200 На первой стадии концентрат наносили на колонку с CABS-сефарозой, уравновешенную 0,01 М MES-буфером. При промывании колонки исходным буфером в свободном объеме были выявлены карбоксипептидаза, субтилизиноподобная протеиназа и глутамат-специфичная протеиназа (рис. 2). Элюирование белков проводили тем же буфером, содержащим 0,05 М NaCl. Во фракциях элюата обнаружена пептидаза, проявляющая активность по L-Ala-pNA и гидролизующая цефалексин, при этом достигалась 5-кратная очистка фермента по каждому из субстратов, с 80%-ным выходом (табл. 1). Однако во фракциях, содержащих аминопептидазу, наряду с активностью по L-Ala-pNA и цефалексину определялась активность по субстратам, характерным для глутаматспецифичной пептидазы, пролилдипептидил-аминопептидазы. Отделение аминопептидазы от сопутствующих пептидаз и последующую очистку проводили на бацитрацин-сефарозе (рис. 3). Элюат, полученный после предыдущей стадии, концентрировали ультрафильтрацией и наносили на. колонку о бацитрацин-сефарозой, уравновешенную 0,05 М натрийацетатным буфером. Пептидазы, расщепляющие L-Glu-pNA и Gly-L-PropNA, не сорбировались и выходили при промывании колонки исходным буфером. Аминопептидазу, прочно связанную с сорбентом, элюировали 0,5 М NaCl в 25%-ном глицерине. Выход по активности составил 70%. Удельная активность возросла в 7 раз как по гидролизу L-Ala-pNA, так и по гидролизу цефалексина (табл. Г). Дальнейшую очистку фермента проводили на колонке с сефадексом G-200. Аминопептидаза, обладающая способностью гидролизовать L-Ala-pNA и цефалексин, элюируется с колонки одним белковым пиком (рис. 4). Таким образом, по разработанной схеме была выделена аминопептидаза с выходом по активности в среднем 32% и степенью очистки в 2200 раз. Полученный препарат аминопептидазы является гомогенным белком по данным электрофореза в присутствии DS-Na. Молекулярная масса 2230

6 Рис. 3. Аффинная хроматография аминопептидазы на бацитрацин-сефарозе: 1 оптическая плотность при 280 нм, 2 6 активности (ед/мл) по L-Ala-pNA (2), цефалексину (3), L-Glu-pNA (4), Gly-L-Pro-pNA (5) Рис. 4. Гель-фильтрация аминопептидазы на сефадексе G-200: 1 оптическая плотность при 280 нм, 2 активности (ед/мл) по L-Ala-pNA, 3 по цефалексину фермента, определенная с DS-Na, соответствовала 70±2 кда. Следует отметить, что молекулярная масса аминопептидазы, определенная методом гель-фильтрации на колонке с сефадексом G-200, составляла кда (рис. 5). Сопоставление данных электрофореза в ПААГ с DS-Na и гельфильтрации на сефадексе G-200 указывает на то, что выделенная ами- 2231

7 Рис. 5. Определение молекулярной массы аминопептидазы из X. rubrilineans: 1 ферритин, 2 аминопептидаза, 3 каталаза, 4 альдолаза, 5 бычий сывороточный альбумин, 6 яичный альбумин Рис. 6. Зависимость активности (1) и стабильности (2) аминопептидазы от ph нопептидаза является тетрамерным белком, диссоциирующим в присутствии DS-Na на 4 субъединицы с молекулярной массой 70 кда. Изофокусирование в градиенте плотности сахарозы в интервале ph 3,0 12,0 показало, что аминопептидаза из X rubrilineans имеет изоэлектрическую точку в нейтральной области pi 6,8. Аминопептидаза проявляет максимальную активность по субстратам L-Ala-pNA и цефалексину прц ph 6,5 (рис. 6). Фермент стабилен в широком диапазоне значений ph и сохраняет более 80% исходной активности при ph от 4,0 до 8,0 в течение 24 ч (рис. 6). Температурный оптимум, определенный при ph 6,5, равен 40. При повышении температуры до 45 фермент полностью инактивируется в течение 15 мин, что позволяет отнести аминопептидазу к термолабильным ферментам. Активность аминопептидазы в значительной степени зависит от природы и ионной силы буферного раствора. Как следует из данных табл. 2, максимальная активность фермента по гидролизу L-Ala-pNA и цефалексина проявляется в 0,05 М натрий-ацетатном буфере и почти полностью подавляется в 0,05 М боратном буфере. С увеличением ионной силы буферных систем активность аминопептидазы возрастает. 2232

8 Таблица 2 Влияние ионов металлов и различных буферных систем на активность аминопептидазы Относительная активность, % Ион металла, буфер Концентрация, мм гидролиз L-Ala-pNA гидролиз цефалексив? Натрий-ацетатный буфер, ph 6, Mg Mg Са Со Мп Zn+a Fe И Cu Hg Боратный буфер, ph 6,4 50 И 16 Ацетатно-аммонийный буфер, ph 6, Трис-НС1-буфер, ph 7, Влияние ингибиторов на активность аминопептидазы из X. г ubrilitieans Остаточная активность, % Таблица 3 Ингибитор Концентрация, мм гидролиз L-Ala-pNA гидролиз цефалексина Фенилметилсульфонилфторид Диизопропил фторфосфат Ацетат ртути ЭДТА о-фенантролин , о-фенантролин + Са о-фенантролин+со N-Меркаптоэтанол Дитиотреитол N-Этилмал еинимид Моноиодацетамид п-хмб * п-хмб+ дитиотреитол п-хмб + меркаптозтанол N-Бромсукцинимид Овомукоид 2** Ингибитор трипсина из сои 2** из фасоли 2** * Ингибирование 24 ч, 0,05 М трис-нс 1-буфер, ph 8,0. ** Концентрация в мг/мл. Исследовалось действие ряда ингибиторов и активаторов на пептидазную и цефалексинамидазную активности фермента. Полученные данные представлены в табл. 3. Так, о-фенантролин и ионы тяжелых метал- 223,3

9 лов Fe2+, Cu2+, Hg2+ в концентрациях 10 мм практически полностью подавляли активности фермента. Пептидазная и цефалексинамидазная активности фермента частично восстанавливались (на 15 20%) при добавлении ионов Са2+ или Со2+. я-хлормеркурбензоат также ингибировал обе активности фермента. Добавление эквимолярных количеств меркаптоэтанола и дитиотреитола приводило к восстановлению активности аминопептидазы на 60%. Отсутствие ингибирования при добавлении N-этилмалеинимида и моноиодацетамида позволяет предположить, что подавление активности аминопептидазы не обязательно связано с блокированием сульфгидрильной группы, а может объясняться, например, взаимодействием с ионами металла в активном центре, на это же указывает и ингибирование фермента о-фенантролином. Фенилметилсуфонилфторид и диизопропилфторфосфат не оказывали влияния на активность фермента. Активность аминопептидазы также не изменялась в присутствии белковых ингибиторов овомукоида, ингибиторов трипсина из сои и фасоли. Таким образом, в гомогенном виде выделена уникальная аминопептидаза, способная наряду с гидролизом различных пептидных субстратов расщеплять амидную связь в антибиотике цефалексине. Подтверждением того факта, что обе активности являются свойством одного и того же фермента, могут служить результаты ингибиторного анализа, а также данные по изучению зависимости активности и стабильности фермента от ph. В связи с выявлением у выделенного фермента аминопептидазной и цефалексинамидазной активностей представляло значительный интерес более подробное изучение его субстратной специфичности. Использование в качестве субстратов я-нитроанилидов аминокислот показало, что аминопептидаза расщепляет я-нитроанилиды L-аланина, L-лейцина, L-валина, L-фенилаланина и не проявляет активности по отношению к я-нитроанилидам L-аргинина, L-лизина, L-глутаминовой кислоты и Пронина (табл. 4). Из приведенных данных следует, что наибольшая активность наблюдалась при использовании в качестве субстратов я-нитроанилидов L-аланина и L-лейцина и значительно ниже по отношению к я-нитроанилидам L-фенилаланина и L-валина. Сравнение активности Таблица 4 Субстратная специфичность аминопептидазы из A", rubrilineans по гидролизу я-нитроанилидов а-аминокислот Субстрат Активность, ед/мкг Относительная активность, % L-Ala-pNA 2,7 100 D-Ala-pNA 0,0085 0,3 L-Leu-pNA 1,22 45 D-Leu-pNA 0,029 1,1 L-Phe-pNA 0,28 10 L-Val-pNA 0,21 8 L-Glu-pNA 0 0 L-Arg-pNA 0 0 L-Lys-pNA 0 0 L-Pro-pNA

10 Субстратная специфичность аминопептидазы из X. r tib r ilitie a s по ди-, три- и тетрапептидным субстратам Субстрат Удельная активность, ед/мкг Относительная активность, % Дипептиды L-Leu-Gly 0, Gly-L-Leu 0, Gly-Gly 0, L-Ala-L-Met 0, L-Gly-L-Val 0, L-Gly-L-Asp 0,003 2 Gly-L-Phe 0,003 2 Трипептиды Gly-Gly-Gly 0, Gly-Gly-L-Ala 0, Тетрацедтиды Gly-Gly-Gly-Gly 0, Сравнение свойств аминопептидазы из X. r u b r ilin e a n s и ферментов из X. c itr i IFO 3835 и A. tu r b id a n s АТСС 9325 Таблица 6 Свойства фермента X. rubrilineans X. citri 3835 [18, 19] A. turbidans ATCC 9325 [16, 17] Мг, кда Количество субъединиц Мг субъединиц, кда , 72 pi 6,8 7,8 5,8 рн-оитимум действия 6,4 6,4 6,2 Диапазон рн-устойчивости 4,0 8,0 4,0 9,5 3,0 9,0 Температурный оптимум, С Активность (ед/мкг) по отношению к: метиловому эфиру D-фенилглицина 0,71 2,055 2,553 метиловому эфиру L-Ala 0,8 1,33 метиловому эфиру L-Leu 0,091 0,746 цефалексину 0,54 0,989 1,332 синтезу цефалексина из метилового 0,11 0,409 0,433 эфира D-фенилглицина и 7-АДЦК L-Ala-pNA 2,7 L-Leu-Gly 0,122 фермента по степени гидролиза я-нитроанилидов L- и D-аминокислот показало, что гидролиз L-изомеров протекает с гораздо большей скоростью (табл. 4). В то же время при длительном гидролизе достигается весьма глубокое (до 80%) расщепление я-нитроанилидов D-аминокислот. Таким образом, гидролиз я-нитроанилидов D-аминокислот не может объясняться содержанием в них небольшой примеси L-изомеров. Данные по гидролизу пептидных субстратов аминопептидазой представлены в табл. 5. Среди дипептидов с наибольшей скоростью фермент расщепляет лейцил-глицин, активность по этому субстрату в 3 раза выше активности по диглицину. Сравнение удельной активности фермента по субстратам триглитт.ину и дигдицилаланину дает возможность предположить, что для аминопептидазы предпочтительнее субстрат, со- 2235

11 Влияние на пептидазную активность по L-Ala-pNA (принята равной 100%) компонентов реакции гидролиза и синтеза цефалексина Компонент Концентрация, мм Остаточная активность, % Молярное отношение компонент:субстрат Цефалексин 14,0 5,0 7 Метиловый эфир D-фенилглицина 44,6 8, АДЦК 22,3 91,0 11 D-Фенилглицин 24,0 22,0 12 держащий в Расположении остаток аминокислоты без бокового радикала. Поскольку аминопептидаза обладает способностью расщеплять пептидную и амидную связи в субстратах, представляло интерес исследовать ее активность в отношении эфиров а-аминокислот. Проведенные исследования показали, что аминопептидаза катализирует гидролиз метиловых эфиров L-алаиина, L-лейцина и L-фенилглицина. Она также может осуществлять перенос ацильного радикала от метилового эфира D-фенилглицина на 7-АДЦК с образованием цефалексина (табл. 6). Обнаруженная необычная субстратная специфичность у аминопептидазы из X rubrilineans могла бы объясняться тем, что в молекуле фермента содержится несколько каталитических центров. Для изучения вопроса об участии одного или нескольких каталитических центров в данных реакциях исследовалось влияние компонентов реакций гидролиза и синтеза цефалексина на аминопептидазную активность фермента (табл. 7). Согласно приведенным данным наиболее выраженный ингибиторный эффект на гидролиз аминопептидазой L-AlapNA оказывали цефалексин и метиловый эфир D-фенилглицина. Подавление пептидазной активности компонентами реакций гидролиза и синтеза цефалексина, вероятно, обусловлено конкуренцией используемых субстратов за один активный центр. Для окончательного ответа на вопрос о количестве активных центров необходимо детальное изучение механизма ингибиторного действия цефалексина и метилового эфира D-фенилглицина. Согласно литературным данным из культур Xanihomonas citri IFO 3835 и Acetobacter turbidans ATCC 9325 представителей семейства Pseudomonaceae выделены ферменты в гомогенном виде [16 19]. Сравнение физико-химических свойств аминопептидазы из X. rubrilineans и ферментов из X. citri и A. turbidans показало, что все три фермента имеют одинаковую молекулярную массу, равное число субъединиц,, сходные температурные и рн-оптимумы действия, а также близкий диапазон ph-устойчивости. Ферменты из X. citri и A. turbidans, как и выделенная нами аминопептидаза, не относятся к числу термостабильных ферментов. Аминокислотный состав их сходен, практически не обнаружено существенных различий, за исключением больших отклонений в содержании цистеина (табл. 8). При сопоставлении результатов ингибиторного анализа оказалось, что известные ингибиторы сериновых протейная диизопропилфторфосфат и фспилметилсульфонолфторид не влияли как на активность ферментов из X. citri и A. turbidans, так и на изучавшуюся аминопептидазу. Следует также отметить, что сравнивае- 2236

12 Аминокислотный состав аминопептидазы из X. r u b r ilin e a n s и ферментов из X. c i t r i IFO 3835 и A. tu r b id a n s АТСС 9325 (в остатках на 1 субъединицу) Аминокислота X. rubrilineans X. citri IFO 3835* [13] A. turbidans АТСС9325* [16] Asp Thr Ser Glu Gly Ala VaCys Val lie Leu Tyr Phe Lys His, Arg Pro Met Trp Всего Расчетная молекулярная мае са субъединицы, кда * Пересчитано нами. мые ферменты в одинаковой степени ингибировались я-хмб и бромсукцинимидом. Однако активность сохранялась в присутствии N-этилмалеинимида и моноиодацетамида и подавлялась ионами тяжелых металлов Fe2+, Cu2+, ITg2+. Ферменты из X. citri и A. turbidans подобно аминопептидазе из X. rubrilineans расщепляют амидную связь в цефалексине и, кроме того, обладают эстеразной и цефалексинсинтетазной активностями [16 19]. К сожалению, не было представлено данных о действии этих ферментов на пептидные субстраты. Тем не менее очевидно, что ферменты из X. citri и A. turbidans по ряду биохимических свойств сходны с аминопептидазой из X. rubrilineans. Можно предположить, что описанные в литературе ферменты наряду с гидролизом эфирной и амидной связей способны гидролизовать пептидные субстраты подобно изученной аминопептидазе из X. rubrilineans. СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ 1. Vogt V. M.//J. Biol. Chem V. 245, 18. Р Roncari G Zuber Я.У/Int. G. Protein Res: V. 1. P Zuber H, Rnncari. G./JAngew. Chem B , S, Lee С. C., Market J. R.//Biochim. et biophys. acta V P Machuga E. G., Ives D. Я.у/Biochim. et biophys. acta V P Desmazeand M. J., Zevaco С.ЦMilchwissenschaft B S

13 7. Крестьянова И. Н., Васильева Л. И., Денякина Е. R., Петрова Л. И., Пензикова Г. А., Бартошевич Ю. Э., Неклюдов А. Д.ЦПрикл. биохимия и микробиология Т С Петрова Л. И., Пензикова Г. А., Левитов М. М.ЦАнтибиотики С Бондарева Н. С. Дис.... канд. биол. наук. М.: ВНИИ антибиотиков, Иванова Н. М., Ваганова Т. И., Стронгин А. Я., Степанов В. Л4.//Биохимия Т С Svatek Е.ЦCS1. Farm V. 14. Р Люблинская Л. А., Ваганова Т. И., Пасхина Т. С., Степанов В. М.//Биохимия Т С Мосолова О. В Р уд ен ска я Г. Н., Степанов В. Л4.//Биохимия Т, С Vesterberg О., Svetisson #.//Acta Chem. Scand V. 20. P Lowry О. M., Rosebrough N. Farr A. L., Randall R. /.//J. Biol. Chem V P Ryu Y. W., Ryu D. D. У.ЦEnzyme. Microb. Technol V P Ryu Y. W., Ryu D. D. Y./JEnzyme. Microb. Technol V P Rato R.t Rawahara /(., Rakinuma A., Takahashi Т.ЦAgric. Biol. Chem V P Rato R-, Rawahara R.t Takahashi T., Rakinuma A.//Agric. Biol. Chem V P Всесоюзный научно-исследовательский Поступила в редакцию институт антибиотиков, Москва Химический факультет Московского После доработки государственного университета им. М. В. Ломоносова I. N. KRESTYANOVА, N. N. UVAROV, О. N. RUDENSKAYА, V. V. TSIBANOV, L. /. VASILYEVA, V. М. STEPANOV INTRACELLULAR AMINO PEPTIDASE FROM XANTHOMONAS RU BRILINEANS CAPABLE TO HYDROLYZE a-amino ACID ESTERS AND CEPHALEXIN All-Union Research Institute of Antibiotics, Moscow Faculty of Chemistry, M. V. Lomonosov Moscow State University Key words: aminopeptidase, X. rubrilinearis,. hydrolyze a-amino acid esters, cephalexin. The aminopeptidase was isolated from cell-free extracts of Xanlhomonas rubrilineans by protein precipitation by isopropyl ester with subsequent purification by affinity chromatography on CABS-Sepharose, bacitracin-sepharose, gel filtration through Sephadex G-200 and ultrafiltration, the total yield being 32% with 2200-fold purification. The enzyme was homogeneous during SDS-PAAG electrophoresis. Apart from the broad spectrum of the peptidase activity, aminopeptidase possesses a hydrolase activity towards 3-lactame antibiotics and an esterase activity towards L- and D-amino acids. Besides, this enzyme catalyzes the actyl transfer reaction during cephalexin synthesis from the D-phenylglycine ester and 7-aminodesacetoxycephalosporanic acid. The maximal enzyme activity furing L-Ala-pNA and cephalexin hydrolysis is manifested at ph 6.5. The enzyme is stable at ph and is inhibited by o-phenanthroline, p-chloromercuribenzoate, hydrogen acetate and N-bromosuceiihmide. The molecular mass of the enzyme is kda. The enzyme is a tetramer; the molecular mass of each of its four subunits is 70+2 kda. The isoelectric point for the enzyme is 6.8, The amino acid composition of the enzyme appears as follows: Aspi63, Thr33, Ser32, Glu72, Glys5, 72Cys3_4, Val45, Ile24, Ьеи5з, Туг:2з, Phe24, Lys23, Hisie, Arg36, Proso, Met25, Ala

R N H. Методы получения аминов CH 3 Cl + 2 NH 3. катализ. Химические свойства аминов

R N H. Методы получения аминов CH 3 Cl + 2 NH 3. катализ. Химические свойства аминов Тема 23. Амины. Аминокислоты и пептиды Содержание темы: Амины, их классификация и номенклатура. Способы получения и химические свойства аминов. Анилин, его электронное строение. Зависимость основных свойств

Подробнее

1. Ковалентные связи в белках и ферментах. Приведите примеры.

1. Ковалентные связи в белках и ферментах. Приведите примеры. 1. Ковалентные связи в белках и ферментах. Приведите примеры. БИЛЕТ 1 2. На чем основано разделение белков фракционированием в присутствии разных концентраций солей. От каких примесей этот метод позволяет

Подробнее

АМИНОКИСЛОТЫ. ПЕПТИДЫ. БЕЛКИ

АМИНОКИСЛОТЫ. ПЕПТИДЫ. БЕЛКИ АМИНОКИСЛОТЫ. ПЕПТИДЫ. БЕЛКИ Аминокислотами называются карбоновые кислоты, в углеводородном радикале которых один или несколько атомов водорода замещены аминогруппами. В зависимости от взаимного расположения

Подробнее

ПРОТЕИНАЗЫ BACILLUS INTERMEDIUS, СЕКРЕТИРУЕМЫЕ В ПОЗДНЕЙ СТАЦИОНАРНОЙ ФАЗЕ РОСТА

ПРОТЕИНАЗЫ BACILLUS INTERMEDIUS, СЕКРЕТИРУЕМЫЕ В ПОЗДНЕЙ СТАЦИОНАРНОЙ ФАЗЕ РОСТА УДК 577.156.576.851.5[6] ПРОТЕИНАЗЫ BACILLUS INTERMEDIUS, СЕКРЕТИРУЕМЫЕ В ПОЗДНЕЙ СТАЦИОНАРНОЙ ФАЗЕ РОСТА Н.П. Балабан, А.М. Марданова, М.Р. Шарипова, Л.А. Габдрахманова, Ю.С. Токмакова, Е.А. Соколова,

Подробнее

H 2 NCHCOOH H 3 NCHCOO - H 3 N CH 2 COO - + H 2 O H 2 N CH 2 COO - + H 3 O + COO - H + H COOH R COOH

H 2 NCHCOOH H 3 NCHCOO - H 3 N CH 2 COO - + H 2 O H 2 N CH 2 COO - + H 3 O + COO - H + H COOH R COOH 1 Особенности строения, реакционной способности и методы синтеза аминокислот. Белки Соединение, которое содержит одновременно и кислотную функциональную группу, и аминогруппу, является аминокислотой. Кислотно-основные

Подробнее

Биологическая химия. Биохимия полости рта. Учебник. Т.П. Вавилова А.Е. Медведев

Биологическая химия. Биохимия полости рта. Учебник. Т.П. Вавилова А.Е. Медведев Т.П. Вавилова А.Е. Медведев Биологическая химия Биохимия полости рта Учебник Министерство образования и науки РФ Рекомендовано ГБОУ ВПО «Первый Московский государственный медицинский университет имени

Подробнее

Температура, при которой каталитическая активность фермента максимальна, называется его температурным оптимумом.

Температура, при которой каталитическая активность фермента максимальна, называется его температурным оптимумом. скорость реакции, мкмоль/мин ВЛИЯНИЕ ТЕМПЕРАТУРЫ НА АКТИВНОСТЬ ФЕРМЕНТОВ 1 0.8 0.6 0.4 0.2 0 10 20 30 40 50 60 70 температура, градусы Цельсия Температура, при которой каталитическая активность фермента

Подробнее

ПЕРВИЧНАЯ СТРУКТУРА ПЕПТИДОВ И БЕЛКОВ

ПЕРВИЧНАЯ СТРУКТУРА ПЕПТИДОВ И БЕЛКОВ ПЕРВИЧНАЯ СТРУКТУРА ПЕПТИДОВ И БЕЛКОВ H 2 H H + H H H + H 1 2 H H +... H H 3 n H H 2 H H H... H H 1 2 3 n Метиновые группы Амидные группы H 2 H H H... H H 1 2 3 n -конец Боковые радикалы С-конец Состав

Подробнее

Аминокислоты и белки. Аминокислоты H 2 N COOH R. Строение, свойства H 2 NCH 2 COOH

Аминокислоты и белки. Аминокислоты H 2 N COOH R. Строение, свойства H 2 NCH 2 COOH 1 Аминокислоты и белки Строение, свойства Спирали встречаются во многих областях: в архитектуре, в макромолекулах белков, нуклеиновых кислот и даже в полисахаридах (Loretto hapel, Santa Fe, NM/ Sarbo )

Подробнее

Химия. Лекция 3. α-аминокислоты, пептиды, белки. Лекцию читает проф. Белавин Иван Юрьевич

Химия. Лекция 3. α-аминокислоты, пептиды, белки. Лекцию читает проф. Белавин Иван Юрьевич Химия Лекция 3 α-аминокислоты, пептиды, белки. Лекцию читает проф. Белавин Иван Юрьевич 2. α- аминокислоты, пептиды, белки α-аминокислоты белки биорегуляторы источник энергии α-аминокислоты гетерофункциональные

Подробнее

БИОХИМИЯ Под редакцией члена-корреспондента РАН, профессора Е.С. СЕВЕРИНА

БИОХИМИЯ Под редакцией члена-корреспондента РАН, профессора Е.С. СЕВЕРИНА БИОХИМИЯ Под редакцией члена-корреспондента РАН, профессора Е.С. СЕВЕРИНА 5-е издание, исправленное и дополненное Учебник Рекомендовано Учебно-методическим объединением по медицинскому и фармацевтическому

Подробнее

Состав, строение и функции белков

Состав, строение и функции белков Состав, строение и функции белков Строение и функция белков Белок самый важный органический компонент клетки Белки очень разнообразны по строению и функциям Содержание белков в различных клетках колеблется

Подробнее

RU (11) (19) (51) МПК C12N 9/48 ( ) C12N 9/64 ( )

RU (11) (19) (51) МПК C12N 9/48 ( ) C12N 9/64 ( ) РОССИЙСКАЯ ФЕДЕРАЦИЯ (19) RU (11) (1) МПК C12N 9/48 (06.01) C12N 9/64 (06.01) 2 412 997 (13) C2 R U 2 4 1 2 9 9 7 C 2 ФЕДЕРАЛЬНАЯ СЛУЖБА ПО ИНТЕЛЛЕКТУАЛЬНОЙ СОБСТВЕННОСТИ, ПАТЕНТАМ И ТОВАРНЫМ ЗНАКАМ (12)

Подробнее

Свойства ферментов. Ферменты биологические катализаторы, обеспечивающие катализ метаболических реакций

Свойства ферментов. Ферменты биологические катализаторы, обеспечивающие катализ метаболических реакций Лекция 4 Свойства ферментов Кинетика ферментативных реакций Механизм функционирования ферментов Механизм реакции, катализируемой химотрипсином Классификация ферментов Свойства ферментов Ферменты биологические

Подробнее

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ Определение активности ОФС.1.2.4.0013.15 ферментных препаратов Взамен ГФ XI, вып.2, стр. 25 Настоящая общая фармакопейная статья

Подробнее

Протеиногенные аминокислоты. 1.Неполярные

Протеиногенные аминокислоты. 1.Неполярные Протеиногенные аминокислоты. 1.Неполярные АК с липофильным (гидрофобным) радикалом алифатическим или ароматическим Ala Val Leu Ile Pro Trp Phe Met Аминокислоты. 2.Полярные, незаряженные Gly Ser Cys Tyr

Подробнее

ИССЛЕДОВАНИЕ МЕХАНИЗМА ДЕЙСТВИЯ БИОЦИДОВ ЭТОНИЯ И МЕРТИОЛАТА. А. Н. Леонтьева, В. Ф. Смирнов, Н. Е. Яранцева Нижегородский госуниверситет

ИССЛЕДОВАНИЕ МЕХАНИЗМА ДЕЙСТВИЯ БИОЦИДОВ ЭТОНИЯ И МЕРТИОЛАТА. А. Н. Леонтьева, В. Ф. Смирнов, Н. Е. Яранцева Нижегородский госуниверситет УДК 577.151.042 ИССЛЕДОВАНИЕ МЕХАНИЗМА ДЕЙСТВИЯ БИОЦИДОВ ЭТОНИЯ И МЕРТИОЛАТА НА β-d-фруктофуранозидазу SACCHAROMYCES СEREVISIAE А. Н. Леонтьева, В. Ф. Смирнов, Н. Е. Яранцева Нижегородский госуниверситет

Подробнее

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РЕСПУБЛИКИ БЕЛАРУСЬ. 31 декабря 2003 г. Регистрационный

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РЕСПУБЛИКИ БЕЛАРУСЬ. 31 декабря 2003 г. Регистрационный МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РЕСПУБЛИКИ БЕЛАРУСЬ УТВЕРЖДАЮ Первый заместитель министра 31 декабря 2003 г. Регистрационный 104 0803 В.В. Колбанов СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ И ОЧИСТКИ АНТИГЕННО-АКТИВНОГО НЕЙРОСПЕЦИФИЧЕСКОГО

Подробнее

РЕШЕНИЕ ГЕНЕТИЧЕСКИХ ЗА ДАЧ

РЕШЕНИЕ ГЕНЕТИЧЕСКИХ ЗА ДАЧ Екатерина Черткова РЕШЕНИЕ ГЕНЕТИЧЕСКИХ ЗА ДАЧ Урок 2 «Синтез белка» Трансляция синтез белка на матрице РНК транскрипция трансляция ДНК РНК Белок рибосома кодон 5 3 A C A C C A C C C C C A антикодон ирнк

Подробнее

БИОЛОГИЯ КИНЕТИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА ГЛУТАТИОНРЕДУКТАЗЫ ИЗ ПЕЧЕНИ КРЫС В НОРМЕ И ПРИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОМ ТОКСИЧЕСКОМ ГЕПАТИТЕ

БИОЛОГИЯ КИНЕТИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА ГЛУТАТИОНРЕДУКТАЗЫ ИЗ ПЕЧЕНИ КРЫС В НОРМЕ И ПРИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОМ ТОКСИЧЕСКОМ ГЕПАТИТЕ БИОЛОГИЯ УДК 577.152.1:616 КИНЕТИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА ГЛУТАТИОНРЕДУКТАЗЫ ИЗ ПЕЧЕНИ КРЫС В НОРМЕ И ПРИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОМ ТОКСИЧЕСКОМ ГЕПАТИТЕ А. А. Агарков, А. В. Семенихина, Т. И. Рахманова, Т. Н. Попова, К.

Подробнее

ISSN Техника и технология пищевых производств ПРАКТИЧЕСКИЕ АСПЕКТЫ ГИДРОЛИЗА КАЗЕИНА МОЛОКА ЭНДОПЕПТИДАЗАМИ

ISSN Техника и технология пищевых производств ПРАКТИЧЕСКИЕ АСПЕКТЫ ГИДРОЛИЗА КАЗЕИНА МОЛОКА ЭНДОПЕПТИДАЗАМИ УДК 637.147.2:577.122.2 ISSN 2074-9414. Техника и технология пищевых производств. 2013. 2 1 М.Г. Курбанова, О.Н. Бондарчук, С.М. Масленникова ПРАКТИЧЕСКИЕ АСПЕКТЫ ГИДРОЛИЗА КАЗЕИНА МОЛОКА ЭНДОПЕПТИДАЗАМИ

Подробнее

СРАВНИТЕЛЬНАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА АКТИВНОСТИ ЛИПАЗ ФЕРМЕНТАТИВНЫХ ПРЕПАРАТОВ

СРАВНИТЕЛЬНАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА АКТИВНОСТИ ЛИПАЗ ФЕРМЕНТАТИВНЫХ ПРЕПАРАТОВ СРАВНИТЕЛЬНАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА АКТИВНОСТИ ЛИПАЗ ФЕРМЕНТАТИВНЫХ ПРЕПАРАТОВ Бельских А.А. Тобольский Педагогический Институт им. Д.И.Менделеева (Филиал) ТюмГУ в г. Тобольске Тобольск, Россия COMPARATIVE CHARACTERISTIC

Подробнее

Институт медицинской биотехнологии ФБУН ГНЦ ВБ Вектор, Бердск, Россия

Институт медицинской биотехнологии ФБУН ГНЦ ВБ Вектор, Бердск, Россия Мамедова Л.В. 1, Лебедев Л.Р. 2 1 Дипломница, ФГБОУ ВО Кубанский государственный университет, Краснодар; 2 д.м.н., зав. лабораторией нуклеиновых кислот и рекомбинантных белков, Институт медицинской биотехнологии

Подробнее

ЧАСТНАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

ЧАСТНАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РЕСПУБЛИКИ БЕЛАРУСЬ ЧАСТНАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ «ФИЛГРАСТИМА РАСТВОР КОНЦЕНТРИРОВАННЫЙ» 06/2017:2206 Введена в действие с 01 июня 2017 года приказом Министерства здравоохранения

Подробнее

20-я МЕЖДУНАРОДНАЯ БИОЛОГИЧЕСКАЯ ОЛИМПИАДА июля Тсукуба, ЯПОНИЯ

20-я МЕЖДУНАРОДНАЯ БИОЛОГИЧЕСКАЯ ОЛИМПИАДА июля Тсукуба, ЯПОНИЯ Код студента: 20-я МЕЖДУНАРОДНАЯ БИОЛОГИЧЕСКАЯ ОЛИМПИАДА 12 19 июля 2009 Тсукуба, ЯПОНИЯ ПРАКТИЧЕСКИЙ ТЕСТ 2 БИОХИМИЯ Общее количество баллов: 100 Продолжительность: 90 минут 1 Дорогие участники, В этом

Подробнее

Основы молекулярной структуры и конформации белков. (повторение известных фактов о строении белков)

Основы молекулярной структуры и конформации белков. (повторение известных фактов о строении белков) ГУ НИИ БМХ РАМН Основы молекулярной структуры и конформации белков (повторение известных фактов о строении белков) проф. А.С. Иванов 2008 1 Общая структура аминокислот Белки - линейные макромолекулы, состоящие

Подробнее

ХАРАКТЕРИСТИКА МЕМБРАННОГО КОМПЛЕКСА ЖИВЫХ ТКАНЕЙ ЛИСТВЕННИЦЫ СИБИРСКОЙ

ХАРАКТЕРИСТИКА МЕМБРАННОГО КОМПЛЕКСА ЖИВЫХ ТКАНЕЙ ЛИСТВЕННИЦЫ СИБИРСКОЙ е Химия растительного сырья. 2000. 4. С. 49 53. УДК 630*181.324 ХАРАКТЕРИСТИКА МЕМБРАННОГО КОМПЛЕКСА ЖИВЫХ ТКАНЕЙ ЛИСТВЕННИЦЫ СИБИРСКОЙ П.В. Миронов, Е.В. Алаудинова, Ю.С. Шимова, С.М. Репях Сибирский

Подробнее

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ Определение белка ОФС.1.2.3.0012.15 Взамен ст. ГФ XII, ч.1, ОФС 42-0053-07 Определение содержания белка проводят в лекарственных

Подробнее

Предполагаемое расположение аминокислот на гранях икосаэдра 1

Предполагаемое расположение аминокислот на гранях икосаэдра 1 Анри Волохонский Предполагаемое расположение аминокислот на гранях икосаэдра 1 Правильный двадцатигранник (икосаэдр) является фундаментальной формой организации живой материи. Такая форма, в отличие от

Подробнее

Исследование структуры и динамики потенциалочувствительного домена канала Kv2.1 человека методом ЯМР-спектроскопии

Исследование структуры и динамики потенциалочувствительного домена канала Kv2.1 человека методом ЯМР-спектроскопии Московский физико-технический институт Факультет биологической и медицинской физики Кафедра физико-химической биологии и биотехнологии Институт биоорганической химии им. М.М.Шемякина и Ю.А. Овчинникова

Подробнее

Применение ионообменной хроматографии для очистки аконитатгидратазы из миокарда крысы в условиях нормы и при индукции апоптоза

Применение ионообменной хроматографии для очистки аконитатгидратазы из миокарда крысы в условиях нормы и при индукции апоптоза 689 УДК 577.152+616.127+599.323.4 Применение ионообменной хроматографии для очистки аконитатгидратазы из миокарда крысы в условиях нормы и при индукции апоптоза Йама Нинон Инес., Попова Т.Н., Рахманова

Подробнее

РАЗДЕЛ IV. НАУКИ О ЖИВОМ

РАЗДЕЛ IV. НАУКИ О ЖИВОМ РАЗДЕЛ IV. НАУКИ О ЖИВОМ ЗАДАЧА 1 Вещество F, γ-лактон 2,3-дегидро-L-гулоновой кислоты (L-аскорбиновая кислота, витамин С), без сомнения, всем вам хорошо известно. Это вещество играет очень важную биологическую

Подробнее

Т.В.Чуйкова. Учебное пособие по дисциплине «Химические основы жизни». 1. АМИНОКИСЛОТЫ. Общий фрагмент H 2 N CH COOH

Т.В.Чуйкова. Учебное пособие по дисциплине «Химические основы жизни». 1. АМИНОКИСЛОТЫ. Общий фрагмент H 2 N CH COOH 1. АМИНОКИСЛОТЫ 1.1. Классификация и строение. α-аминокислоты гетерофункциональные соединения. Они обязательно содержат карбоксильную группу и аминогруппу, находящиеся у одного и того же углеродного атома.

Подробнее

ВЛИЯНИЕ КОМПОНЕНТОВ ЭНЗИМАТИЧЕСКОЙ СРЕДЫ НА БИОСИНТЕЗ ТРИПТОФАНА

ВЛИЯНИЕ КОМПОНЕНТОВ ЭНЗИМАТИЧЕСКОЙ СРЕДЫ НА БИОСИНТЕЗ ТРИПТОФАНА УДК 579.222 ВЛИЯНИЕ КОМПОНЕНТОВ ЭНЗИМАТИЧЕСКОЙ СРЕДЫ НА БИОСИНТЕЗ ТРИПТОФАНА С. М. Шульга А. Ф. Ткаченко Е. А. Тигунова ГУ «Институт пищевой биотехнологии и геномики» Н. Е. Бейко НАН Украины, Киев А. И.

Подробнее

Вариант 1. Контрольная работа 5 (2-ой семестр). Кинетика. Катализ.

Вариант 1. Контрольная работа 5 (2-ой семестр). Кинетика. Катализ. Вариант 1. 1. Запишите скорость реакции 3 Н 2 + N 2 = 2NН 3. Каково соотношение скорости реакции, выраженной по водороду, со скоростями, выраженными по другим компонентам? 2. Дайте определение молекулярности

Подробнее

МИНИСТЕРСТВО ОБРАЗОВАНИЯ И НАУКИ РФ

МИНИСТЕРСТВО ОБРАЗОВАНИЯ И НАУКИ РФ МИНИСТЕРСТВО ОБРАЗОВАНИЯ И НАУКИ РФ ФЕДЕРАЛЬНОЕ ГОСУДАРСТВЕННОЕ БЮДЖЕТНОЕ ОБРАЗОВАТЕЛЬНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ ВЫСШЕГО ПРОФЕССИОНАЛЬНОГО ОБРАЗОВАНИЯ «НИЖЕГОРОДСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ ТЕХНИЧЕСКИЙ УНИВЕРСИТЕТ имени Р.Е.

Подробнее

МЕТОДЫ ИДЕНТИФИКАЦИИ ЖЕНСКОГО, КОЗЬЕГО И КОРОВЬЕГО МОЛОКА С.В.

МЕТОДЫ ИДЕНТИФИКАЦИИ ЖЕНСКОГО, КОЗЬЕГО И КОРОВЬЕГО МОЛОКА С.В. УДК 637.144.5:577.1 МЕТОДЫ ИДЕНТИФИКАЦИИ ЖЕНСКОГО, КОЗЬЕГО И КОРОВЬЕГО МОЛОКА С.В. Симоненко, Н.В. Гавриленко 1, Е.М. Червяковский 1, В.П. Курченко 1 НИИ детского питания Россельхозакадемии, Истра, Российская

Подробнее

Белковые молекулы, ускоряющие (катализирующие) химические реакции в живых системах называют ферментами (энзимами, enzyme).

Белковые молекулы, ускоряющие (катализирующие) химические реакции в живых системах называют ферментами (энзимами, enzyme). Белковые молекулы, ускоряющие (катализирующие) химические реакции в живых системах называют ферментами (энзимами, enzyme). Как правило, ферменты катализируют один тип химических реакций (реакционная специфичность)

Подробнее

УДК 637.055 Влияние условий ферментации белков молока на пептидный профиль гидролизатов Д.т.н. Забодалова Л.А., к.х.н. Скворцова Н.Н., Данилов И.М., к.б.н. Касумов М.К. danilovivan86@gmail.com Санкт-Петербургский

Подробнее

«Химические основы биологических процессов»

«Химические основы биологических процессов» «Химические основы биологических процессов» * Часть II. ХИМИЧЕСКАЯ ЭНЗИМОЛОГИЯ Текущие и рубежные вопросы. ТЕМА 1 1. Роль водородных связей в стабилизации структуры белка. Примеры. Величины свободных энергий.

Подробнее

Химия и Жизнь 6 OH 5 H 1O 4 H H HN CH 3 O OH. На рисунке изображена структурная формула N-ацетил-D-глюкозамина в проекции Хеуорса

Химия и Жизнь 6 OH 5 H 1O 4 H H HN CH 3 O OH. На рисунке изображена структурная формула N-ацетил-D-глюкозамина в проекции Хеуорса Задача 1 Химия и Жизнь Иммобилизация на хитозане Ферменты, биологические белковые катализаторы, обладают как рядом преимуществ (высокие скорости процессов и селективность), так и некоторыми недостатками,

Подробнее

ИЗУЧЕНИЕ АМИНОКИСЛОТНОГО СОСТАВА ПОДЗЕМНЫХ И НАДЗЕМНЫХ ОРГАНОВ ВАЛЕРИАНЫ ВОЛЖСКОЙ И ВАЛЕРИАНЫ СОМНИТЕЛЬНОЙ, ПРОИЗРАСТАЮЩИХ В ВОРОНЕЖСКОЙ ОБЛАСТИ

ИЗУЧЕНИЕ АМИНОКИСЛОТНОГО СОСТАВА ПОДЗЕМНЫХ И НАДЗЕМНЫХ ОРГАНОВ ВАЛЕРИАНЫ ВОЛЖСКОЙ И ВАЛЕРИАНЫ СОМНИТЕЛЬНОЙ, ПРОИЗРАСТАЮЩИХ В ВОРОНЕЖСКОЙ ОБЛАСТИ УДК 615.543 ИЗУЧЕНИЕ АМИНОКИСЛОТНОГО СОСТАВА ПОДЗЕМНЫХ И НАДЗЕМНЫХ ОРГАНОВ ВАЛЕРИАНЫ ВОЛЖСКОЙ И ВАЛЕРИАНЫ СОМНИТЕЛЬНОЙ, ПРОИЗРАСТАЮЩИХ В ВОРОНЕЖСКОЙ ОБЛАСТИ Н. С. Фурса 1, О. А. Колосова 2, И. М. Коренская

Подробнее

Вариант 3. Поскольку объем газовой смеси увеличился в три раза, был добавлен 1 л газа, и объем полученной смеси стал равен 1.5 л. M ср = 43.

Вариант 3. Поскольку объем газовой смеси увеличился в три раза, был добавлен 1 л газа, и объем полученной смеси стал равен 1.5 л. M ср = 43. Вариант 3 2 1. Ион ХО 4 содержит 50 электронов. Определите неизвестный элемент и напишите уравнение взаимодействия Х в виде простого вещества с горячей концентрированной азотной кислотой. (6 баллов) Решение.

Подробнее

РЕГУЛЯЦИЯ МОЛЕКУЛЯРНЫХ ФОРМ β-глюкозидазы РАСТЕНИЙ МЕТАБОЛИТАМИ И ФАКТОРАМИ СРЕДЫ

РЕГУЛЯЦИЯ МОЛЕКУЛЯРНЫХ ФОРМ β-глюкозидазы РАСТЕНИЙ МЕТАБОЛИТАМИ И ФАКТОРАМИ СРЕДЫ РЕГУЛЯЦИЯ МОЛЕКУЛЯРНЫХ ФОРМ β-глюкозидазы РАСТЕНИЙ МЕТАБОЛИТАМИ И ФАКТОРАМИ СРЕДЫ А.Н. Ершова, О.Н. Баркалова, С.Е. Долбилина Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования

Подробнее

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ Определение подлинности и чистоты иммунобиологических лекарственных препаратов методом вестерн-блот ОФС.1.7.2.0022.15 Вводится

Подробнее

Обработка растворов альбумина и иммуноглобулина с помощью ультрафильтрационной системы «ПЕЛЛИКОН»

Обработка растворов альбумина и иммуноглобулина с помощью ультрафильтрационной системы «ПЕЛЛИКОН» MILLIPORE Обработка растворов альбумина и иммуноглобулина с помощью ультрафильтрационной системы «ПЕЛЛИКОН» ВВЕДЕНИЕ На протяжении многих лет ультрафильтрация использовалась, как эффективный метод разделения

Подробнее

БИОХИМИЧЕСКИЕ ПРОЦЕССЫ. БЕЛКИ, ФЕРМЕНТЫ

БИОХИМИЧЕСКИЕ ПРОЦЕССЫ. БЕЛКИ, ФЕРМЕНТЫ Федеральное агентство по образованию Государственное оборазовательное учреждение высшего профессионального образования Ивановский государственный химико-технологический университет П.Б. РАЗГОВОРОВ, С.В.

Подробнее

Олимпиада «ЛОМОНОСОВ» ХИМИЯ ВАРИАНТ 1

Олимпиада «ЛОМОНОСОВ» ХИМИЯ ВАРИАНТ 1 Олимпиада «ЛОМОНОСОВ» ХИМИЯ ВАРИАНТ 1 1.1. Красный цвет крови большинства позвоночных обусловлен гемоглобином. Рассчитайте массовую долю водорода в гемоглобине C 2954 H 4516 N 780 O 806 S 12 Fe 4. (4 балла)

Подробнее

УЧЕНЫЕ ЗАПИСКИ КАЗАНСКОГО ГОСУДАРСТВЕННОГО УНИВЕРСИТЕТА Том 152, кн. 2 Естественные науки 2010

УЧЕНЫЕ ЗАПИСКИ КАЗАНСКОГО ГОСУДАРСТВЕННОГО УНИВЕРСИТЕТА Том 152, кн. 2 Естественные науки 2010 УЧЕНЫЕ ЗАПИСКИ КАЗАНСКОГО ГОСУДАРСТВЕННОГО УНИВЕРСИТЕТА Том 152, кн. 2 Естественные науки 2010 УДК 577.151 СЕКРЕТИРУЕМАЯ МЕТАЛЛОПРОТЕИНАЗА BACILLUS INTERMEDIUS: ПОЛУЧЕНИЕ ГОМОГЕННОГО ПРЕПАРАТА ФЕРМЕНТА

Подробнее

Определение БАПНА-амидазной активности микроорганизмов, сывороток крови и иммуноглобулинов класса G

Определение БАПНА-амидазной активности микроорганизмов, сывороток крови и иммуноглобулинов класса G МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РЕСПУБЛИКИ БЕЛАРУСЬ УТВЕРЖДАЮ Первый заместитель министра здравоохранения Л.А. Постоялко 17 мая 2002 г. Регистрационный No 6-0101 Определение БАПНА-амидазной активности микроорганизмов,

Подробнее

Номенклатура Изомерия Свойства Получение Белки

Номенклатура Изомерия Свойства Получение Белки Номенклатура Изомерия Свойства Получение Белки Аминокислоты органические бифункциональные соединения, в состав которых входят карбоксильные группы СООН и аминогруппы -NH 2. Общая формула предельных аминокислот

Подробнее

Методы получения препаратов интерфазных клеточных ядер и изучения их состава.

Методы получения препаратов интерфазных клеточных ядер и изучения их состава. Методы получения препаратов интерфазных клеточных ядер и изучения их состава. Изменение структуры ядра и его компартментов при естественной экспрессии генома (прорастании) и при встраивании чужеродных

Подробнее

Лекция Функции белков и связь между их структурой и функцией. 2. Методы, используемые при работе с белками.

Лекция Функции белков и связь между их структурой и функцией. 2. Методы, используемые при работе с белками. Лекция 3. 1. Функции белков и связь между их структурой и функцией. 2. Методы, используемые при работе с белками. Функции белков 1. Ферментативная: многие белки ферменты, катализирующие разнообразные химические

Подробнее

МАСС-СПЕКТРОМЕТРИЯ В ПРОТЕОМНЫХ ИССЛЕДОВАНИЯХ

МАСС-СПЕКТРОМЕТРИЯ В ПРОТЕОМНЫХ ИССЛЕДОВАНИЯХ МАСС-СПЕКТРОМЕТРИЯ В ПРОТЕОМНЫХ ИССЛЕДОВАНИЯХ Часть 2: Приложения ПРОТЕОМИКА набор высокотехнологичных методов установления состава сложных смесей белков 1) определение количества того или иного белка

Подробнее

Химия для школьников 7 11 класса (очный тур) Решения. Простые задачи (вариант 2)

Химия для школьников 7 11 класса (очный тур) Решения. Простые задачи (вариант 2) Химия для школьников 7 11 класса (очный тур) Решения. Простые задачи (вариант ) Решение задачи 1. Синтез нанопленки Очевидно, что неметалл это кислород, вещество оксид. Ни один из оксидов постоянной валентности

Подробнее

Семинар 3. Биологические молекулы

Семинар 3. Биологические молекулы Семинар 3 Биологические молекулы Вода и ее биологическая роль Вода H 2 0 Молекулярный вес 18,01528 а.е.м. 18 г/моль, Плотность 998,2 кг/м 3 (при 20 0 С) Температура кипения 100 0 С, замерзания 0 0 С Теплоемкость

Подробнее

Приложение Р Параметры экологической пластичности и стабильности

Приложение Р Параметры экологической пластичности и стабильности Приложение Р Параметры экологической пластичности и стабильности Таблица Р.1 Параметры экологической пластичности и стабильности по урожайности сортов сои Сорт Амурская область Хабаровский край Саратовская

Подробнее

Практическое занятие «Цветные реакции для обнаружения аминокислот и белков»

Практическое занятие «Цветные реакции для обнаружения аминокислот и белков» ФЕДЕРАЛЬНОЕ ГОСУДАРСТВЕННОЕ БЮДЖЕТНОЕ ОБРАЗОВАТЕЛЬНОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ ВЫСШЕГО ОБРАЗОВАНИЯ «РОСТОВСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ МЕДИЦИНСКИЙ УНИВЕРСИТЕТ» МИНИСТЕРСТВА ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ КОЛЛЕДЖ Практическое

Подробнее

Решение варианта Пусть в смеси было х моль цинка и у моль нитрата цинка. Уравнения реакций: Zn + 0.5O 2. = (или 69.

Решение варианта Пусть в смеси было х моль цинка и у моль нитрата цинка. Уравнения реакций: Zn + 0.5O 2. = (или 69. Решение варианта 1 1.5. Положительные ионы с конфигурацией 1s 2 2s 2 2p 6 3s 2 3p 6 : K + и Ca 2+, отрицательные ионы с конфигурацией 1s 2 2s 2 2p 6 : F и O 2. Возможные соединения: KF, K 2 O, CaF 2 и

Подробнее

АМИНОКИСЛОТЫ ПЕПТИДЫ БЕЛКИ

АМИНОКИСЛОТЫ ПЕПТИДЫ БЕЛКИ АМИНОКИСЛОТЫ ПЕПТИДЫ БЕЛКИ СТРУКТУРА И ФИЗИКО-ХИМИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА АМИНОКИСЛОТ 20 аминокислот входят в состав белков (протеиногенные аминокислоты). Это -аминокислоты, в которых функциональные аминои карбоксильная

Подробнее

Аминокислоты. Белки. Спец. и бак.: 1, 4, 6, 7, 9, 10, 15, 16, 18, 23, 26, 29, 36, 37, 38в, 41, 46, 48, 50, 61, 63, 67, 68.

Аминокислоты. Белки. Спец. и бак.: 1, 4, 6, 7, 9, 10, 15, 16, 18, 23, 26, 29, 36, 37, 38в, 41, 46, 48, 50, 61, 63, 67, 68. Аминокислоты. Белки Спец. и бак.: 1, 4, 6, 7, 9, 10, 15, 16, 18, 23, 26, 29, 36, 37, 38в, 41, 46, 48, 50, 61, 63, 67, 68. 1. Назовите по номенклатуре IUPAC следующие соединения: 2. Приведите структурные

Подробнее

Вариант 2. Поскольку объем газовой смеси увеличился в 1.5 раза, было добавлено 0.5 л газа, и объем смеси стал равен 1.5. M ср = 65.

Вариант 2. Поскольку объем газовой смеси увеличился в 1.5 раза, было добавлено 0.5 л газа, и объем смеси стал равен 1.5. M ср = 65. Вариант 2 1. Ион ХО 4 содержит 50 электронов. Определите неизвестный элемент и напишите уравнение взаимодействия Х в виде простого вещества с холодным раствором гидроксида натрия. (6 баллов) Решение. Неизвестный

Подробнее

Информация о продукте

Информация о продукте Информация о продукте Реагент «Лира» для выделения РНК, ДНК и белков (LR-100, LR-200) Набор «Лира+» для выделения РНК и ДНК (LRP-100-2) Набор «Лира+» для выделения РНК, ДНК и белков (LRP-100-3) Важно!

Подробнее

ПОДБОР ПАРАМЕТРОВ ФЕРМЕНТАТИВНОГО ГИДРОЛИЗА КАЗЕИНА

ПОДБОР ПАРАМЕТРОВ ФЕРМЕНТАТИВНОГО ГИДРОЛИЗА КАЗЕИНА УДК 637.147.2 : [66.094.941 : 577.15] ПОДБОР ПАРАМЕТРОВ ФЕРМЕНТАТИВНОГО ГИДРОЛИЗА КАЗЕИНА Новосёлова М. В., Борисова Г. В., Бондарчук О. Н., Малова Ю. С. Кемеровский технологический институт пищевой промышленности,

Подробнее

студентки четвёртого курса Факультета биоинженерии и биоинформатики МГУ им. М. В. Ломоносова Носиковой Екатерины

студентки четвёртого курса Факультета биоинженерии и биоинформатики МГУ им. М. В. Ломоносова Носиковой Екатерины Отчёт о качестве расшифровки структуры мутантного комплекса тиаминазы 2 с формил аминометил-пиримидином Bacillus subtilis (PDB код 2QCX) методом рентгеноструктурного анализа студентки четвёртого курса

Подробнее

М. А. Арабцева, А. Т. Епринцев, М. И. Фалалеева, И. В. Парфенова. Воронежский государственный университет

М. А. Арабцева, А. Т. Епринцев, М. И. Фалалеева, И. В. Парфенова. Воронежский государственный университет биология УДК 577.152.83 Очистка и регуляторные свойства тетрамерной формы малатдегидрогеназы из бактерий Sphaerotilus natans Воронежский государственный университет Поступила в редакцию 9.03.2008 г. Аннотация.

Подробнее

Молекулы белков представляют собой линейные полимеры, состоящие из L-аминокислот (которые являются мономерами) и, в некоторых случаях, из

Молекулы белков представляют собой линейные полимеры, состоящие из L-аминокислот (которые являются мономерами) и, в некоторых случаях, из АМИНОКИСЛОТЫ Аминокислоты органические бифункциональные соединения, в состав которых входят карбоксильные группы СООН и аминогруппы -NH2. Простейший представитель аминоуксусная кислота H2N-CH2-COOH (глицин)

Подробнее

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ Электрофорез ОФС.1.2.1.0021.15 Взамен ст. ГФ XI, вып.1 Электрофорез метод анализа, основанный на способности заряженных частиц,

Подробнее

22-я МЕЖДУНАРОДНАЯ БИОЛОГИЧЕСКАЯ ОЛИМПИАДА июля, Тайпей, Тайвань ПРАКТИЧЕСКИЙ ТЕСТ 1 БИОХИМИЯ И КЛЕТОЧНАЯ БИОЛОГИЯ

22-я МЕЖДУНАРОДНАЯ БИОЛОГИЧЕСКАЯ ОЛИМПИАДА июля, Тайпей, Тайвань ПРАКТИЧЕСКИЙ ТЕСТ 1 БИОХИМИЯ И КЛЕТОЧНАЯ БИОЛОГИЯ Код студента: 22-я МЕЖДУНАРОДНАЯ БИОЛОГИЧЕСКАЯ ОЛИМПИАДА 0-7 июля, 20 Тайпей, Тайвань ПРАКТИЧЕСКИЙ ТЕСТ БИОХИМИЯ И КЛЕТОЧНАЯ БИОЛОГИЯ Общее количество баллов: 00 Продолжительность: 90 минут Дорогие участники,

Подробнее

МЕТОДОМ ВЫСОКОЭФФЕКТИВНОЙ ЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ

МЕТОДОМ ВЫСОКОЭФФЕКТИВНОЙ ЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ 273 УДК 543. 544 РАЗДЕЛЕНИЕ ПРОИЗВОДНЫХ ЭНАНТИОМЕРОВ АМИНОКИСЛОТ НА АМИНИРОВАННОМ β-циклодекстрине МЕТОДОМ ВЫСОКОЭФФЕКТИВНОЙ ЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ И. А. Ананьева, Е. Н. Шаповалова, С. А. Лопатин, О.

Подробнее

Физиолого-биохимические основы культивирования клеток животных и человека. Лекция 10

Физиолого-биохимические основы культивирования клеток животных и человека. Лекция 10 Физиолого-биохимические основы культивирования клеток животных и человека Лекция 10 План лекции: 1. Типы питательных сред для культивирования клеток животных. 2. Основные компоненты химически определенных

Подробнее

Набор «ФБиоГель» для выделения двунитевой ДНК из геля или очистки от реакционной смеси на центрифужных колонках. (НК-2-4, НК-2-50)

Набор «ФБиоГель» для выделения двунитевой ДНК из геля или очистки от реакционной смеси на центрифужных колонках. (НК-2-4, НК-2-50) Набор «ФБиоГель» для выделения двунитевой ДНК из геля или очистки от реакционной смеси на центрифужных колонках. (НК-2-4, НК-2-50) Содержание Компоненты набора... 3 Условия и срок хранения... 3 Ограничения

Подробнее

МЕТАЛЛСВЯЗЫВАЮЩАЯ СПОСОБНОСТЬ ФЛУОРЕСЦИРУЮЩИХ ПИГМЕНТОВ БАКТЕРИЙ РОДА PSEUDOMONAS

МЕТАЛЛСВЯЗЫВАЮЩАЯ СПОСОБНОСТЬ ФЛУОРЕСЦИРУЮЩИХ ПИГМЕНТОВ БАКТЕРИЙ РОДА PSEUDOMONAS МЕТАЛЛСВЯЗЫВАЮЩАЯ СПОСОБНОСТЬ ФЛУОРЕСЦИРУЮЩИХ ПИГМЕНТОВ БАКТЕРИЙ РОДА PSEUDOMONAS О.В. Блажевич, Н.П. Максимова Белорусский государственный университет, г.минск, Беларусь Среди антимикробных соединений,

Подробнее

Преимущества колонок Agilent AdvanceBio SEC для эксклюзионной хроматографии при анализе биофармацевтических препаратов

Преимущества колонок Agilent AdvanceBio SEC для эксклюзионной хроматографии при анализе биофармацевтических препаратов Преимущества колонок Agilent AdvanceBio SEC для эксклюзионной хроматографии при анализе биофармацевтических препаратов Сравнение колонок различных производителей для повышения качества данных Обзор технической

Подробнее

Олимпиада «ЛОМОНОСОВ» ХИМИЯ ВАРИАНТ 2

Олимпиада «ЛОМОНОСОВ» ХИМИЯ ВАРИАНТ 2 Олимпиада «ЛОМОНОСОВ» ХИМИЯ ВАРИАНТ 2 1.3. Зеленый цвет фотосинтезирующих организмов обусловлен хлорофиллом. Рассчитайте массовую долю углерода в хлорофилле С 55 Н 72 О 5 N 4 Mg. (4 балла) Решение. Молярная

Подробнее

Введение. Рис. 1. Распределение химических соединений, зарегистрированных CAS, по классам (на )

Введение. Рис. 1. Распределение химических соединений, зарегистрированных CAS, по классам (на ) 1 Введение Рис. 1. Распределение химических соединений, зарегистрированных AS, по классам (на 01.01.2000) Особенности жизненных процессов Структура живых организмов 3 2 3 3 Fe - ( 2 ) 2 2 - ( 2 ) 2 3 Аминокислоты

Подробнее

семенах (около 35%), а также на том, что соевый белок среди всех растительных наиболее близок по аминокислотному составу к животному. Переработка соев

семенах (около 35%), а также на том, что соевый белок среди всех растительных наиболее близок по аминокислотному составу к животному. Переработка соев Важность выполнения инновационных работ с применением новых технологий в настоящее время неоспорима. Традиционные методы переработки растительного и животного сырья зачастую дороги, требуют применения

Подробнее

5. ИНДИВИДУАЛЬНЫЕ ЗАДАНИЯ. Вариант 1

5. ИНДИВИДУАЛЬНЫЕ ЗАДАНИЯ. Вариант 1 5. ИНДИВИДУАЛЬНЫЕ ЗАДАНИЯ Вариант 1 1. Напишите структуры соединений, являющихся продуктами модификации важнейших аминокислот (укажите каких?): 1) 5-окситриптамин (серотонин) соединение, играющее важную

Подробнее

XLI Турнир имени М.В. Ломоносова Конкурс по химии. 30 сентября 2018 г. лист 1 из 5

XLI Турнир имени М.В. Ломоносова Конкурс по химии. 30 сентября 2018 г. лист 1 из 5 лист 1 из 5 Решение задачи 1. Всего 8 баллов. Обозначим исходную массу раствора M 1 (г) Тогда исходный (1%) раствор содержит 0, 99M 1 г воды и 0, 01M 1 г растворенного вещества. После испарения: масса

Подробнее

50-ая Эстонская Школьная биологическая олимпиада Практическая работа по биохимии

50-ая Эстонская Школьная биологическая олимпиада Практическая работа по биохимии 1 50-ая Эстонская Школьная биологическая олимпиада Практическая работа по биохимии Имя :... Фамилия:... Школа :... Класс :... Группа :... Определение пероксидазной активности в овощах и фруктах Введение

Подробнее

Одиннадцатый класс Задача 11-1

Одиннадцатый класс Задача 11-1 Одиннадцатый класс Задача 11-1 Неорганические соединения А, B,, D, E, F, G, Н состоят из металла X и неметалла Y (содержание металла приведено в таблице). Все они твёрдые вещества. Таблица 1 Содержание

Подробнее

Амины, аминокислоты, пептиды. Вариант 1

Амины, аминокислоты, пептиды. Вариант 1 Вариант 1 1. Назовите приведенные ниже соединения. NH NH 2. Выберите правильный ряд увеличения основности и объясните: 3. Осуществите превращение: l 2 2 N ( ) 2 HN 3 Fel 3 P, t H 2 S 4 H 2 4. Изобразите

Подробнее

Многие из методов количественного определения, описанные в данном разделе, могут быть выполнены с использованием имеющихся в продаже наборов.

Многие из методов количественного определения, описанные в данном разделе, могут быть выполнены с использованием имеющихся в продаже наборов. 06/2017:20533 2.5.33. ОБЩИЙ БЕЛОК Многие из методов количественного определения, описанные в данном разделе, могут быть выполнены с использованием имеющихся в продаже наборов. МЕТОД 1 Белок в растворе

Подробнее

Вариант 1. Поскольку объем газовой смеси увеличился в 1.25 раза, был добавлен 1 л газа и объем смеси стал равен 5 л.

Вариант 1. Поскольку объем газовой смеси увеличился в 1.25 раза, был добавлен 1 л газа и объем смеси стал равен 5 л. Вариант 1 1. Ион ХО 2 содержит 24 электрона. Определите неизвестный элемент и напишите уравнение взаимодействия Х в виде простого вещества с раскалённым литием. (6 баллов) Решение. Неизвестный элемент

Подробнее

Лабораторная работа 2. Приготовление растворов и изучение их свойств. Цель работы: исследовать процесс растворения веществ; овладеть методиками

Лабораторная работа 2. Приготовление растворов и изучение их свойств. Цель работы: исследовать процесс растворения веществ; овладеть методиками Лабораторная работа 2. Приготовление растворов и изучение их свойств. Цель работы: исследовать процесс растворения веществ; овладеть методиками приготовления растворов заданной концентрации, изучение их

Подробнее

СПб ГБПОУ 3 ПМ 03 Проведение лабораторных биохимических исследований Преподаватель Башарина О.Б учебный год Курс 3, семестр 6 Раздел 3.

СПб ГБПОУ 3 ПМ 03 Проведение лабораторных биохимических исследований Преподаватель Башарина О.Б учебный год Курс 3, семестр 6 Раздел 3. СПб ГБПОУ 3 ПМ 03 Проведение лабораторных биохимических исследований Преподаватель Башарина О.Б. 2018-2019 учебный год Курс 3, семестр 6 Раздел 3. Проведение лабораторных биохимических исследований по

Подробнее

Безотходная биотехнология производства белкового корма из птичьего помета

Безотходная биотехнология производства белкового корма из птичьего помета Безотходная биотехнология производства белкового корма из птичьего помета Технология относится к сельскому хозяйству и предназначена для производства высококачественного корма для сельскохозяйственных

Подробнее

СТРУКТУРА И ГЕНЕТИЧЕСКИЕ ФУНКЦИИ БИОПОЛИМЕРОВ

СТРУКТУРА И ГЕНЕТИЧЕСКИЕ ФУНКЦИИ БИОПОЛИМЕРОВ Цена 18 коп. СТРУКТУРА И ГЕНЕТИЧЕСКИЕ ФУНКЦИИ БИОПОЛИМЕРОВ НАУКОВА ДУМКА" КИЕВ-1975 АКАДЕМИЯ НАУК УКРАИНСКОЙ ССР ИНСТИТУТ МОЛЕКУЛЯРНОЙ БИОЛОГИИ И ГЕНЕТИКИ СТРУКТУРА И ГЕНЕТИЧЕСКИЕ ФУНКЦИИ БИОПОЛИМЕРОВ

Подробнее

БЕЛКИ ЦИТОПЛАЗМЫ МЕРИСТЕМ ПОЧЕК ЕЛИ: ДИНАМИКА АМИНОКИСЛОТНОГО СОСТАВА

БЕЛКИ ЦИТОПЛАЗМЫ МЕРИСТЕМ ПОЧЕК ЕЛИ: ДИНАМИКА АМИНОКИСЛОТНОГО СОСТАВА ХИМИЯ РАСТИТЕЛЬНОГО СЫРЬЯ. 2007. 4. С. 95 100. УДК 630*181.324 БЕЛКИ ЦИТОПЛАЗМЫ МЕРИСТЕМ ПОЧЕК ЕЛИ: ДИНАМИКА АМИНОКИСЛОТНОГО СОСТАВА П.В. Миронов, Е.В. Алаудинова, Ю.С. Шимова, С.Ю. Симкина * Сибирский

Подробнее

ИССЛЕДОВАНИЕ НЕКОТОРЫХ ФИЗИКО-ХИМИЧЕСКИХ СВОЙСТВ АДЕНИНДЕЗАМИНАЗЫ В РАЗЛИЧНЫХ БИОЛОГИЧЕСКИХ ОБЪЕКТАХ

ИССЛЕДОВАНИЕ НЕКОТОРЫХ ФИЗИКО-ХИМИЧЕСКИХ СВОЙСТВ АДЕНИНДЕЗАМИНАЗЫ В РАЗЛИЧНЫХ БИОЛОГИЧЕСКИХ ОБЪЕКТАХ öáñó³ñ³ñ³ï³ý ï»ë³ï³ý Ñá¹í³ÍÝ»ñ Экспериментальные и теоретические статьи Experimental and theoretical articles Биолог. журн. Армении, 3 (66), 2014 ИССЛЕДОВАНИЕ НЕКОТОРЫХ ФИЗИКО-ХИМИЧЕСКИХ СВОЙСТВ АДЕНИНДЕЗАМИНАЗЫ

Подробнее

ОДИННАДЦАТЫЙ КЛАСС Задача 11-1 A B Е Задания: Окраска некоторых соединений Задача 11-2

ОДИННАДЦАТЫЙ КЛАСС Задача 11-1 A B Е Задания: Окраска некоторых соединений Задача 11-2 ОДИННАДЦАТЫЙ КЛАСС Задача 11-1 Металлы А и В серебристо серого цвета были открыты практически в одно время. A легко подвергающийся различной обработке металл, использующийся в авиации и ракетостроении.

Подробнее

ИЗУЧЕНИЕ КАТАЛИТИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ КОМПЛЕКСА ИОНА НИКЕЛЯ (II) С ЛЕЙЦИНОМ НА РАСПАД ГИДРОПЕРОКСИДА КУМОЛА В ВОДНОЙ СРЕДЕ

ИЗУЧЕНИЕ КАТАЛИТИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ КОМПЛЕКСА ИОНА НИКЕЛЯ (II) С ЛЕЙЦИНОМ НА РАСПАД ГИДРОПЕРОКСИДА КУМОЛА В ВОДНОЙ СРЕДЕ ºðºì²ÜÆ äºî²î²ü вزÈê²ð²ÜÆ Æî²Î²Ü îºôºî² Æð Ó ÅÍÛÅ ÇÀÏÈÑÊÈ ÅÐÅÂÀÍÑÊÎÃÎ ÃÎÑÓÄÀÐÑÒÂÅÍÍÎÃÎ ÓÍÈÂÅÐÑÈÒÅÒÀ øçùç³ Ï»Ýë³μ³ÝáõÃÛáõÝ 3, 2012 Õèìèÿ è áèîëîãèÿ Химия УДК 541.49:546.56 ИЗУЧЕНИЕ КАТАЛИТИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ

Подробнее

49-ая Эстонская Школьная биологическая олимпиада

49-ая Эстонская Школьная биологическая олимпиада 1 49-ая Эстонская Школьная биологическая олимпиада Практическая работа по биохимии Имя :... Фамилия :... Школа :... Класс :... Группа :... Руководители : Калле Киппер и Маарья Cооман 2 Определение активности

Подробнее

Мирошников В.М., Николаев А.А., Луцкий Д.Л. Астраханская государственная медицинская академия, Астрахань

Мирошников В.М., Николаев А.А., Луцкий Д.Л. Астраханская государственная медицинская академия, Астрахань 10 УДК 612.616:612.015 ФАКТОРЫ РАЗЖИЖЕНИЯ КОАГУЛИРОВАВШЕГО ЭЯКУЛЯТА ЧЕЛОВЕКА Мирошников В.М., Николаев А.А., Луцкий Д.Л. Астраханская государственная медицинская академия, Астрахань Из аспирата семенных

Подробнее

Осмоловский Александр Андреевич АНТИКОАГУЛЯНТНАЯ ПРОТЕИНАЗА (АКТИВАТОР ПРОТЕИНА С) МИКРОМИЦЕТА ASPERGILLUS OCHRACEUS: ПОЛУЧЕНИЕ И СВОЙСТВА

Осмоловский Александр Андреевич АНТИКОАГУЛЯНТНАЯ ПРОТЕИНАЗА (АКТИВАТОР ПРОТЕИНА С) МИКРОМИЦЕТА ASPERGILLUS OCHRACEUS: ПОЛУЧЕНИЕ И СВОЙСТВА на правах рукописи Осмоловский Александр Андреевич АНТИКОАГУЛЯНТНАЯ ПРОТЕИНАЗА (АКТИВАТОР ПРОТЕИНА С) МИКРОМИЦЕТА ASPERGILLUS OCHRACEUS: ПОЛУЧЕНИЕ И СВОЙСТВА 03.02.03 Микробиология 03.01.06 Биотехнология

Подробнее

С. В. Баранова, В. Н. Бунева, Г. А. Невинский ГИДРОЛИЗ ИНТЕГРАЗЫ ВИРУСА ИММУНОДЕФИЦИТА ЧЕЛОВЕКА КАТАЛИТИЧЕСКИМИ АНТИТЕЛАМИ ПРОТИВ ВИРУСНОЙ ИНТЕГРАЗЫ

С. В. Баранова, В. Н. Бунева, Г. А. Невинский ГИДРОЛИЗ ИНТЕГРАЗЫ ВИРУСА ИММУНОДЕФИЦИТА ЧЕЛОВЕКА КАТАЛИТИЧЕСКИМИ АНТИТЕЛАМИ ПРОТИВ ВИРУСНОЙ ИНТЕГРАЗЫ 74 ËÓÎÓ Ë ÂÒÍË ËÒÒÎÂ Ó Ìˡ УДК 578.828.6 С. В. Баранова, В. Н. Бунева, Г. А. Невинский ÕÓ ÓÒË ËрÒÍËÈ ÓÒÛ рòú ÂÌÌ È ÛÌË ÂрÒËÚÂÚ ÛÎ. œëрó Ó, 2, ÕÓ ÓÒË ËрÒÍ, 630090, ÓÒÒˡ»ÌÒÚËÚÛÚ ıëïë ÂÒÍÓÈ ËÓÎÓ ËË Ë ÙÛÌ

Подробнее

П. И. Гунькова, К. К. Горбатова БИОТЕХНОЛОГИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА БЕЛКОВ МОЛОКА

П. И. Гунькова, К. К. Горбатова БИОТЕХНОЛОГИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА БЕЛКОВ МОЛОКА П. И. Гунькова, К. К. Горбатова БИОТЕХНОЛОГИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА БЕЛКОВ МОЛОКА Санкт-Петербург ГИОРД 2015 УДК 637.12.04/05:577.1(075.8) ББК 36.95 Г94 Рецензент: Скопичев В. Г., доктор биологических наук, профессор

Подробнее

Вариант 4. 5KCl + KClO 3 + 3H 2 O.

Вариант 4. 5KCl + KClO 3 + 3H 2 O. Вариант 4 1. Ион ХО 3 содержит 42 электрона. Определите неизвестный элемент и напишите уравнение взаимодействия Х в виде простого вещества с горячим раствором гидроксида калия. (6 баллов) Решение. Неизвестный

Подробнее

СОДЕРЖАНИЕ. 1.Введение Краткие теоретические сведения Тестовые задания Ответы на тестовые задания Литература.

СОДЕРЖАНИЕ. 1.Введение Краткие теоретические сведения Тестовые задания Ответы на тестовые задания Литература. 2 3 СОДЕРЖАНИЕ 1.Введение...4 2.Краткие теоретические сведения... 4 3.Тестовые задания............................13 4.Ответы на тестовые задания...23 5.Литература. 24 4 ВВЕДЕНИЕ α-аминокислоты, пептиды

Подробнее

Е. Б. Эрдынеева, А. А. Раднагуруева, Е. В. Лаврентьева. Пептидазная активность штамма а 11 amphibacillus alashanensis sp.

Е. Б. Эрдынеева, А. А. Раднагуруева, Е. В. Лаврентьева. Пептидазная активность штамма а 11 amphibacillus alashanensis sp. Е. Б. Эрдынеева, А. А. Раднагуруева, Е. В. Лаврентьева. Пептидазная активность штамма а 11 amphibacillus alashanensis sp. nov ХИМИЯ УДК 577.151.01 doi 10.18101/2306-2363-2016-4-3-10 Е. Б. Эрдынеева, А.

Подробнее